Edman降解是一种经典的蛋白质测序方法，通过逐步从多肽链的N末端切割氨基酸并鉴定其类型，实现对蛋白质氨基酸序列的解析。这一技术由瑞典化学家Pehr Edman于20世纪50年代开发，在分子生物学的早期发展中具有重要作用，为蛋白质结构和功能研究奠定了基础。

一、基本原理

Edman降解的核心思想是利用化学试剂与多肽链的N末端反应，从而选择性地切割并标记首个氨基酸。该方法使用苯异硫氰酸酯（PITC）与N末端氨基酸反应，形成苯基硫氨酰基衍生物（PTC衍生物）；随后通过酸性条件将N末端的PTC氨基酸从多肽链上分离出来，生成环状亚氨基噻唑酮衍生物（ATZ衍生物）；最终ATZ衍生物在碱性条件下异构化为更稳定的酰胺衍生物（PTH衍生物），后者可通过高效液相色谱（HPLC）等技术进行鉴定。

这一过程可以在自动化蛋白质测序仪中循环重复，逐步切割并识别多肽链中的每一个氨基酸，直至完成目标序列的解析。

二、优点与局限性

作为一种化学方法，Edman降解具有高度特异性和准确性，尤其在分析纯化后的短多肽（通常小于50个氨基酸）时效果卓越。这一技术的显著优势在于可以精确解析氨基酸序列，不受基因编码等遗传信息的限制。因此，它特别适用于蛋白质翻译后修饰或天然蛋白序列中的变异分析。

但是它也存在一些限制：首先，方法对样品的纯度要求较高，杂质会干扰化学反应和序列分析；此外测序效率受限于多肽链的长度，较长的多肽或蛋白质通常需要先通过酶解切割成小片段后再进行测序；更重要的是，N末端的化学修饰（如乙酰化）会阻止反应的进行，使得某些蛋白质无法直接应用这种方法测序。

三、应用与现代发展

尽管近年来质谱技术在蛋白质测序领域的应用越来越广泛，Edman降解仍在特定场景中占据重要地位。它被广泛应用于已纯化蛋白质或短肽的序列确认、未知蛋白质的结构研究以及抗体表位分析等研究中。

在生物技术和制药行业，此法常用于验证重组蛋白质或合成多肽的序列，确保其结构与目标序列一致。该方法在研究蛋白质翻译后修饰、剪切位点及特定功能区域的氨基酸组成时，提供了重要信息。

随着技术的进步，这项技术与其他分析技术的结合为其注入了新的活力。例如，通过与高效液相色谱（HPLC）和核磁共振（NMR）的联用，它可以实现对复杂样品的更精确分析。尽管质谱技术以其高通量和多样化的优势成为现代蛋白质组学的主力，Edman降解依然以其独特的准确性和经典地位继续发挥作用。

四、Edman降解与质谱技术的互补性

在实际应用中，这项技术与质谱技术常被结合使用以克服各自的局限性。例如，在对蛋白质的N末端进行精确测序时，它具有更高的特异性，而质谱技术则可以用于检测较长的多肽或识别翻译后修饰。因此，二者的协同使用能够帮助研究人员在蛋白质结构和功能研究中获得更全面的信息。

百泰派克生物科技在Edman降解测序方面拥有丰富经验和技术优势。我们通过优化的实验流程和高灵敏度的分析手段，为客户提供准确、可靠的氨基酸序列测定服务。无论是重组蛋白的质量验证，还是复杂样品的多肽序列分析，我们都能够根据客户需求量身定制解决方案。选择百泰派克，助力您的科研工作更加精准、高效。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

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